【家庭】家庭环境下进行组培的探讨与建议( 二 )



泛生公司的ms原粉价格大约是50元1000克 , 能制备20升ms培养基 。 这对于家庭做组培的爱好者来说 , 花50元钱可以使用一两年 。

4.分装:

将配制好的培养基分装在培养容器中 , 注意要趁热分装 , 因为琼脂在40度以下就会凝固 。 每个培养瓶装培养基大约是瓶容积的1/6~1/5 , 注意不要将培养基挂在瓶的外壁 , 这样容易造成污染 。 分装后用聚丙烯薄膜或着方便面的袋子封口 , 用胶圈固定(胶圈尽量选择自行车的内胎 , 这种胶圈比较耐热) 。

5.灭菌:

采用家庭压力锅消毒 , 建议到医疗器械用品商店买一些“灭菌效果试纸” , 它们可以指示灭菌效果 , 当灭菌达到效果时会变色 。 把试纸和培养基同时放入锅内 , 加热到有大量蒸汽冒出 , 再加上压力伐 , 维持小火30~40分钟 。

灭菌完毕后自然冷却 , 将培养基取出 , 放在阴凉无尘处备用 。

6.接种箱的准备:

新作的接种箱必须要清洁干净 , 尽量做到无死角 。 每次使用前2小时 , 将操作所需要的全部物品放入接种箱 , 再用一个小烧杯加入3~5克高锰酸钾放入接种箱内 , 在箱内向烧杯中倒入2~3毫升的甲醛溶液 , 大约几秒钟后会看到甲醛蒸汽出现 , 这样可以对接种箱内的所有物品进行初次消毒;同时打开紫外线灯照射 。 紫外线灯是高电压穿激汞蒸汽产生的 , 紫外线进行第二道灭菌 , 在紫外线照射大约15分钟后 , 会激发氧气形成臭氧 , 臭氧作为第三道灭菌防线 , 这样经过三次灭菌 , 接种箱基本上可以达到无菌标准 。

在操作前15分钟内 , 向刚才蒸发甲醛用的烧杯中倒入5毫升浓氨水 , 因为甲醛对人体有毒害作用 , 氨水可以和甲醛形成一种叫做“六亚甲基四胺”的固体物质 , 从而中和了甲醛的刺激性蒸汽 。 这个时候紫外灯不要关掉 , 要继续照射 , 直到操作前5分钟关闭 , 维持黑暗5分钟 , 然后再打开日光灯进行操作 。 维持5分钟黑暗的原因是 , 紫外光对微生物的杀灭是作用于dna的胸腺嘧啶 , 形成四聚体 , 但是微生物具有一种光复活蛋白 , 可以在有可见光的环境下还原胸腺四聚体 , 而使微生物复活 , 这个作用叫做“光复活作用” , 所以在关掉紫外灯后必须维持黑暗几分钟 , 避免光复活作用的出现 。
【【家庭】家庭环境下进行组培的探讨与建议】

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